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常見問題QUESTIONS

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一、原代細胞與細胞系有什么區別?
      細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義,第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內需掌握好細胞最大的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
       細胞系是不斷生長,分化的細胞群,因其經過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫療或科研。實際上,連續細胞系可以用大量次培養基培養,隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發生改變。

       需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。


二、倍增和代數有什么區別?

      倍增是培養物中細胞總數加倍,通常是指細胞指數或對數生長期。代數是指細胞群從培養瓶中移出,傳代培養過程的次數,傳代培養的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。


三、接收到的凍存細胞該如何處理?

      收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。


四、有多少經驗才能開始正常人類細胞培養?

      推薦有經驗者在無菌環境下用層流凈化罩工作,如果有經驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養的初學者或打算建立細胞培養實驗室,我們會為你提供幫助。請聯系我們的細胞培養專家。


五、凍存的細胞該如何開始培養?
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
(2) 用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
(3) 將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉,直到管內物體完全融化。
(4) 將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉入無菌環境。
(5) 用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
(6) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內容物。
(7)平衡管內物,用多聚賴氨酸包被培養瓶(多數細胞用T-75的培養瓶)。多數細胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細胞。
(8) 蓋好蓋子,輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
(9) 將培養瓶放放培養箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
(10) 植入培養后第6-16小時更換一次培養基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
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